以部分外泌体专利中外泌体冻干保护剂种类为例，常用的保护剂种类包括糖类、缓冲盐和氨基酸：

① 针对糖类的选择:大部分外泌体文献研究中使用海藻糖，但也有相关专利中使用蔗糖。海藻糖的水解速率，吸湿性以及玻璃化转变温度均要优于蔗糖，但是在其他领域比如抗体领域以及脂质体药物中，蔗糖在上市产品中的使用较多，且蔗糖单价较低，因此，针对糖类的选择要进行实验比较，根据具体情况选择；

② 针对缓冲盐的选择:需要考虑在冷冻干燥情况下的pH偏移情况。在调研到的冻干保护剂中有用到TRIS和PBS的。这个需要根据缓冲体系对稳定性的影响来判定，例如缓冲体系是PBS，当pH变化显著影响制剂中活性成分稳定性，建议弃用PBS，换用其他生物缓冲体系（如组氨酸，Tris，HEPES等）；若影响在可接受范围内，出于生产或审批或其他因素倾向于选择PBS，建议制剂处方中选用海藻糖作为低温保护剂，抑制PBS冷冻时的溶质结晶，提升制剂稳定性；

③ 针对氨基酸的选择，冻干保护剂专利中用到的氨基酸有精氨酸/甘氨酸，精氨酸能够抑制外泌体的聚集，防止发生破裂，甘氨酸可以起到赋形剂及降粘的作用；

但是具体的处方还是要根据实验结果进行比较筛选。

MSC来源的外泌体或分泌物在多种慢性疾病中得到了治疗效果的验证，包括关节炎、ARDS、心梗、克罗恩肠炎、神经性疾病等。临床转化的难点，需要找到针对特定适应症的有效物质、批次间产品质量的均一性和稳定性。

建议检查下胶塞，可能是胶塞水分迁移到产品里了。刚下料，一周时候，分别测水分，就能确认了。

这在结合具体的制备工艺、外泌体的纯度、活性物质的含量及体内外活性、药理试验来确定。

有相关研究显示，N乙酰半胱氨酸对组织和细胞确实有保护作用，但是在上市产品中未见N乙酰半胱氨酸作为保护剂使用；

在上市产品中应用较多的氨基酸保护剂是组氨酸、精氨酸和甲硫氨酸。

可以先通过外观、水分含量、外泌体冻干前后颗粒浓度/粒径的变化、外泌体形态等快速评价，再结合活性检测结果做出初步判断；通过前述的评价后，可以开展加速稳定性试验评价冻干制剂的稳定性，在此基础上，进行长期稳定性试验。

Tris缓冲体系可以作为辅料应用在注射剂中，在目前已上市的四款LNP药物中，有3款均是用到Tris缓冲体系的，且其安全性已经得到了验证，因此当作为辅料使用时，符合药典要求的注射级别Tris缓冲体系在注射剂中应用无安全隐患；

氨丁三醇的衍生物使用时，会产生一定的毒性作用，但毒性作用的产生与使用剂量及注射部位和使用不当相关，应在医生遵嘱下合理用药。

正常如果是容量法，可以用其他试剂先溶解预处理再进行滴定，这个可以找水分仪厂家给具体方案，目前我们实验室用的是库伦法，也可以避免这个问题。