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IPTG | 367-93-1
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中文名称:异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)
参数品牌:AVT
产品参数
品牌:AVT
CAS号:367-93-1
储存方式:推荐2-8℃存储。
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产品详情
技术支持及常见问题解答

1、中文名称:异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)

2、英文名称:Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside

3、化学名称:异丙基β-D-硫代半乳糖苷

4、分子式:C9H18O5S

5、CAS:367-93-1

6、级别:化学试剂级

7、货号:    


一、 理化性质

1、 结构:

2、性状:白色晶体粉末

3、纯度:≥99%

4、分子量:238.3

5、熔点:110℃-114℃

6、比旋光度:-32°

 

二、 运输与保存

推荐2-8℃存储。

三、 使用注意事项

1、含有 IPTG 的培养基 4℃避光保存,须在 1 周内使用。

2、为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3、本产品仅作科研用途。

 

四、 应用

1、储存液配制

①称取 0.238 g IPTG;加入10 mL去离子水充分溶解,配制 0.1 M 的储存液;

②用5-10 mL去离子水润湿0.22μm滤膜;

③上述 IPTG 溶液用0.22μm滤膜除菌,分装成 1 mL,-20℃冷冻保存。

 

2、 蓝白斑筛选

IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性,当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X-gal和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外,它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

(1) X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液

①高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到 50℃左右。

②每毫升培养基内加入 10μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10μL 0.1 M 的 IPTG(使其终浓度达到 1 mM);

③加入适量抗生素;

④混匀后按照平板大小倒入适量培养基,待培养基冷却至室温后,接种细菌于 37℃过夜培养。

(2)X-Gal、IPTG 加到琼脂平板表面

①于无菌超净工作台制备平板(如LB琼脂板);

②取40μL 0.1 M IPTG和120μL 20 mg/mL X-gal 混合,均匀地涂布于准备好的平板上;

备注:平板边缘较难充分涂布均匀,容易产生假阳性,因此,为了得到更好结果,建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。

③37℃孵育直至所有液体被吸收(30 min 或更长)。接种细菌于 37℃过夜培养直到菌落形成。

④根据长出菌体的蓝白色,方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。


A.V.T致力于为中国客户提供品质高辅料产品与技术服务。如您在使用中有任何疑问,请联系我方销售人员,或致电021-58876118,我们将竭诚为您服务。您也可以登录AVT官网www.avt- avt.com查询相关信息,感谢您的支持。
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品牌:AVT
CAS号:367-93-1
储存方式:推荐2-8℃存储。
400-6262-623
产品详情
技术支持及常见问题解答

1、中文名称:异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)

2、英文名称:Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside

3、化学名称:异丙基β-D-硫代半乳糖苷

4、分子式:C9H18O5S

5、CAS:367-93-1

6、级别:化学试剂级

7、货号:    


一、 理化性质

1、 结构:

2、性状:白色晶体粉末

3、纯度:≥99%

4、分子量:238.3

5、熔点:110℃-114℃

6、比旋光度:-32°

 

二、 运输与保存

推荐2-8℃存储。

三、 使用注意事项

1、含有 IPTG 的培养基 4℃避光保存,须在 1 周内使用。

2、为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3、本产品仅作科研用途。

 

四、 应用

1、储存液配制

①称取 0.238 g IPTG;加入10 mL去离子水充分溶解,配制 0.1 M 的储存液;

②用5-10 mL去离子水润湿0.22μm滤膜;

③上述 IPTG 溶液用0.22μm滤膜除菌,分装成 1 mL,-20℃冷冻保存。

 

2、 蓝白斑筛选

IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性,当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X-gal和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外,它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

(1) X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液

①高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到 50℃左右。

②每毫升培养基内加入 10μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10μL 0.1 M 的 IPTG(使其终浓度达到 1 mM);

③加入适量抗生素;

④混匀后按照平板大小倒入适量培养基,待培养基冷却至室温后,接种细菌于 37℃过夜培养。

(2)X-Gal、IPTG 加到琼脂平板表面

①于无菌超净工作台制备平板(如LB琼脂板);

②取40μL 0.1 M IPTG和120μL 20 mg/mL X-gal 混合,均匀地涂布于准备好的平板上;

备注:平板边缘较难充分涂布均匀,容易产生假阳性,因此,为了得到更好结果,建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。

③37℃孵育直至所有液体被吸收(30 min 或更长)。接种细菌于 37℃过夜培养直到菌落形成。

④根据长出菌体的蓝白色,方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。


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